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B16-F0細胞,小鼠黑色素瘤細胞,報價/說明書

  • 產品型號:
  • 產品時間:2024-08-13
  • 簡要描述:B16-F0細胞,小鼠黑色素瘤細胞,報價/說明書,慧穎提供208F 來源,背景資料,細胞形態(tài),培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件,細胞詳細說明書以及注意事項等?;鄯f細胞庫,擁有完善的細胞庫管理體系,供應400多種類細胞株細胞系:國內/外優(yōu)質細胞供應,種類齊全,質量保證,,100%放心免費售后!自細胞庫成立至今,供應于全國各省市地區(qū),擁有北京上海各地中科院研究所,復旦,瑞金,上藥所等各大小型院校及企業(yè)。
  • 產品簡介

庫存現貨,全國各地均可發(fā)貨,全國統(tǒng)一*格,慧穎細胞庫出售品質的B16-F0細胞,小鼠黑色素瘤細胞,報價/說明書 詳細說明如下:

產品名稱:B16-F0細胞

中文名稱:小鼠黑色素瘤細胞

細胞來源:小鼠皮膚

細胞簡介:  B16-F0細胞為小鼠黑色素瘤細胞,來源于小鼠皮膚,中文名為小鼠黑色素瘤細胞,正常的細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。

培養(yǎng)基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2

消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,消化3-5min

傳化比例:1:4-1:10

換液時間:2-3天換液一次

凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

庫存狀態(tài):現貨

細胞純度:94%

細胞活力:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)

細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

慧穎生物出售高品質,傳代次數少,細胞飽滿,光澤度好,來源背景清晰,售后跟蹤及時到位,*的B16-F0細胞,小鼠黑色素瘤細胞,報價/說明書 @慧穎細胞庫出售400多種類細胞株細胞系,20多株耐藥株,細胞來源:中科院、美國ATCC、復旦大學、交通大學、DSMZ、UKNCC、BCRC、日本東京大學、日本IKA中心等。一對一服務,隨時解決細胞培養(yǎng)中疑難問題,跟蹤及時到位,幫您一起完成報告。

傳代細胞培養(yǎng)步驟:1.人無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養(yǎng)用液置37℃下預熱。 3.超凈臺臺面應整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。 4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20 min左右,關閉超凈臺的紫外燈,打開抽風機清潔空氣,除去臭氧。5.點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內。 6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。7.倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3 mL Hanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。8.每個大培養(yǎng)瓶加入1 mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中。9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10 mL/大瓶,3~5 mL/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉,以利于CO2氣體的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。 10.對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。可將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。

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B16-F0細胞,小鼠黑色素瘤細胞,報價/說明書 的培養(yǎng)

【初代培養(yǎng)原理】

將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。

儀器:培養(yǎng)箱(調整至37℃),培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術器械、血球計數板、離心機、水浴箱(37℃)

材料:動物組織塊

試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒

【初代消化培養(yǎng)法】

(1)準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

(2)布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。

(3)處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。

(4)剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。

(5)消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

(6)分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

(7)計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO23調整。

(8)培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。

【初代組織塊培養(yǎng)法】

《1》剪切:把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污,吸靜Hanks液,用眼科剪反復剪切1mm3塊為止。

《2》擺布:用彎頭吸管吸取若干小塊,置于培養(yǎng)瓶中,用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底部,小塊相互距離以0.5cm為宜,每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20~30塊。

《3》輕輕翻轉培養(yǎng)瓶,另瓶底向上,注意翻瓶時勿另組織小塊流動,塞好瓶塞,置36.5℃溫箱培養(yǎng)2小時左右(勿超過4小時),使小塊微干涸。

《培養(yǎng)》從微箱中取出培養(yǎng)瓶,開塞,46度斜持培養(yǎng)瓶,箱瓶底腳部輕輕注入培養(yǎng)液少許,然后緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉過來,讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細胞從組織塊游出數量增多后。再補加培養(yǎng)液。

【傳代培養(yǎng)法原理】

細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。

【材料和試劑】

1)細胞:貼壁細胞株

2)試劑:0.25%胰酶、DMEM 90%,德國SERANA胎牛血清 Fetal Bovine Serum 10%

3)儀器和器材:倒置顯微鏡,培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等

【操作步驟】

1)吸除培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液。

2)向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。

3)置溫箱中2~5分鐘,當發(fā)現細胞質回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。

4)吸除消化液,向瓶內注入Hanks液數毫升,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。

5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。

6)計數板計數后,把細胞懸液分成等份分裝入數個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。

hFOB1.19人SV40轉染成骨細胞株

HaCaT人永生化表皮細胞株

A431人皮膚鱗癌細胞株

CNE人鼻咽癌細胞株

MG69人骨肉瘤細胞株

注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

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