慧穎生物ELISA試劑盒廠家，提供人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒以及說明書，操作步驟和原理。

產(chǎn)品名稱：人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒

英文名稱：Human Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit

品牌：DECO

規(guī)格：48T/96T

貨號：DECO0002

儲存溫度：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)

有效期：6個月

產(chǎn)品特點：檢測范圍廣，靈敏度高，特異性強，精密度高，比較有針對性

品牌優(yōu)勢：提供免費代測，專業(yè)技術(shù)工程師幫老師做均值分析，變異系數(shù)分析等

ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，全血標(biāo)本室溫放置1－2 h或4℃guo夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法：

根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

3. 尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

4. 唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

5. 細胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:

（1）細胞培養(yǎng)上清

 取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

（2）細胞裂解液

收集細胞培養(yǎng)液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預(yù)冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通過反復(fù)凍融，使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

6. 植物標(biāo)本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5 g），用預(yù)冷的PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質(zhì)（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

7. 糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法：

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

8. 組織標(biāo)本收集、處理、保存方法：

將組織樣本用PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重，記錄后剪碎（碎塊盡量?。⒔M織按一定的比例（通常組織重量：PBS體積=1：9）加入預(yù)冷的PBS緩沖液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）中勻漿，勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

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ELISA試劑盒標(biāo)本及收集、貯運要素

① 嚴峻溶血：以HRP為符號的ELISA測定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色構(gòu)成假陽性；

② 混有紅細胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈

③ 如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會發(fā)生假陽性反響；

④ 標(biāo)本凝結(jié)不全，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開端凝結(jié)時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊，易構(gòu)成假陽性成果；

⑤ 采血試管洗滌不*、重復(fù)運用易穿插污染

⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ，樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。

血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測，嚴峻溶血標(biāo)本禁用。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合，使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混勻并避免發(fā)生氣泡?；鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，弄清后再檢測。重復(fù)凍融會使 抗體 效價跌落，所以測 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測，宜少量分裝冰存。

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ELISA試劑盒使用問題及解決方法：

【1】：加樣量不一致？

解決方法：樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。

【2】：樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短？

解決方法：重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與di yi次接近。

【3】：保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致？

解決方法：重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。

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